-
Za studena lisovaný organický jojobový olej jojobový nosný olej zo semien pre starostlivosť o pokožku
Hlavnými zložkami prírodného jojobového oleja sú kyselina palmitová, kyselina eruková, kyselina olejová a kyselina gadoleová. Jojobový olej je tiež bohatý na vitamíny ako vitamín E a vitamín B komplex.
Tekutý rastlinný vosk Jojoba Plant má zlatistú farbu. Jojobový bylinný olej má charakteristickú orieškovú arómu a je preferovaným doplnkom produktov osobnej starostlivosti, ako sú krémy, make-up, šampón atď. Jojobový bylinný liečivý olej sa môže aplikovať priamo na pokožku pri spálení slnkom, psoriáze a akné. Čistý jojobový olej tiež podporuje rast vlasov.
-
Prírodný čistý organický levanduľový esenciálny olej pre aromaterapeutickú starostlivosť o pleť
Spôsob extrakcie alebo spracovania: Destilovaná vodnou parou
Destilácia Extrakčná časť: Kvet
Krajina pôvodu: Čína
Aplikácia: Difúzna/aromaterapia/masáž
Čas použiteľnosti: 3 roky
Prispôsobená služba: vlastný štítok a krabica alebo podľa vašich požiadaviek
Certifikácia: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
100% čistý prírodný organický Magnoliae Officmalis Cortex Oil Esenciálny olej pre starostlivosť o pleť
Vôňa Hou Po je okamžite horká a ostro štipľavá, potom sa postupne otvára hlbokou, sirupovou sladkosťou a teplom.
Hou Po má príbuznosť so zemou a kovovými prvkami, kde jeho horké teplo silne pôsobí na zostup Qi a vysušuje vlhkosť. Vďaka týmto vlastnostiam sa v čínskej medicíne používa na zmiernenie stagnácie a hromadenia v tráviacom trakte, ako aj kašľa a sipotu v dôsledku upchatia hlienov v pľúcach.
Magnolia Officinials je listnatý strom pochádzajúci z hôr a údolí Sichuan, Hubei a ďalších provincií Číny. Vysoko aromatická kôra používaná v tradičnej čínskej medicíne sa zbavuje stoniek, konárov a koreňov, ktoré sa zbierajú v priebehu apríla až júna. Hrubá, hladká kôra, ťažká olejom, má na vnútornej strane fialovú farbu s kryštálovým leskom.
Praktizujúci môžu zvážiť kombináciu Hou Po s esenciálnym olejom Qing Pi ako najlepší kompliment v zmesiach zameraných na rozbíjanie nahromadených látok.
-
OEM vlastný balík Natural Macrocephalae Rhizoma oil
Ako účinné chemoterapeutické činidlo sa 5-fluóruracil (5-FU) široko používa na liečbu malígnych nádorov v gastrointestinálnom trakte, hlave, krku, hrudníku a vaječníkoch. A 5-FU je liek prvej línie na kolorektálny karcinóm na klinike. Akčný mechanizmus 5-FU je blokovať transformáciu nukleovej kyseliny uracilu na tymínovú nukleovú kyselinu v nádorových bunkách, potom ovplyvniť syntézu a opravu DNA a RNA, aby sa dosiahol jej cytotoxický účinok (Afzal a kol., 2009; Ducreux a kol. al., 2015; Longley et al., 2003). 5-FU však tiež spôsobuje hnačku vyvolanú chemoterapiou (CID), jednu z najčastejších nežiaducich reakcií, ktoré trápia mnohých pacientov (Filho et al., 2016). Výskyt hnačky u pacientov liečených 5-FU bol až 50 % – 80 %, čo vážne ovplyvnilo priebeh a účinnosť chemoterapie (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). V dôsledku toho je veľmi dôležité nájsť účinnú terapiu pre CID indukovanú 5-FU.
V súčasnosti sú do klinickej liečby CID importované nemedikamentózne intervencie a liekové intervencie. Nedrogové intervencie zahŕňajú primeranú stravu a doplnenie soli, cukru a iných živín. Lieky ako loperamid a oktreotid sa bežne používajú pri liečbe CID proti hnačke (Benson et al., 2004). Okrem toho sa v rôznych krajinách prijímajú aj etnomedicíny na liečbu CID pomocou vlastnej unikátnej terapie. Tradičná čínska medicína (TCM) je typická etnomedicína, ktorá sa praktizuje už viac ako 2000 rokov v krajinách východnej Ázie vrátane Číny, Japonska a Kórey (Qi et al., 2010). TČM zastáva názor, že chemoterapeutické lieky by vyvolali spotrebu Qi, nedostatok sleziny, žalúdočnú disharmóniu a endofytickú vlhkosť, čo by malo za následok dysfunkciu vodivosti čriev. V teórii TCM by stratégia liečby CID mala závisieť hlavne od dopĺňania Qi a posilňovania sleziny (Wang et al., 1994).
Sušené koreneAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) aPanax ginsengCA Mey. (PG) sú typické bylinné lieky v TČM s rovnakými účinkami na doplnenie Qi a posilnenie sleziny (Li et al., 2014). AM a PG sa zvyčajne používajú ako bylinný pár (najjednoduchšia forma čínskej bylinnej kompatibility) s účinkami na doplnenie Qi a posilnenie sleziny na liečbu hnačky. Napríklad AM a PG boli zdokumentované v klasických prípravkoch proti hnačke ako Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang z r.Taiping Huimin Heji Ju Fang(dynastia Song, Čína) a Bu Zhong Yi Qi Tang zPi Wei Lun(dynastia Yuan, Čína) (obr. 1). Niekoľko predchádzajúcich štúdií uviedlo, že všetky tri vzorce majú schopnosť zmierniť CID (Bai a kol., 2017; Chen a kol., 2019; Gou a kol., 2016). Okrem toho naša predchádzajúca štúdia ukázala, že kapsula Shenzhu, ktorá obsahuje iba AM a PG, má potenciálne účinky na liečbu hnačky, kolitídy (syndróm xiexie) a iných gastrointestinálnych ochorení (Feng et al., 2018). Žiadna štúdia však nediskutovala o účinku a mechanizme AM a PG pri liečbe CID, či už v kombinácii alebo samostatne.
Teraz sa črevná mikroflóra považuje za potenciálny faktor pri pochopení terapeutického mechanizmu TCM (Feng et al., 2019). Moderné štúdie naznačujú, že črevná mikroflóra hrá kľúčovú úlohu pri udržiavaní črevnej homeostázy. Zdravá črevná mikroflóra prispieva k ochrane črevnej sliznice, metabolizmu, imunitnej homeostáze a reakcii a supresii patogénov (Thursby a Juge, 2017; Pickard et al., 2017). Narušená črevná mikroflóra priamo alebo nepriamo zhoršuje fyziologické a imunitné funkcie ľudského tela a vyvoláva vedľajšie reakcie, ako je hnačka (Patel a kol., 2016; Zhao a Shen, 2010). Výskumy ukázali, že 5-FU pozoruhodne posunul štruktúru črevnej mikroflóry u hnačkových myší (Li et al., 2017). Preto účinky AM a PM na hnačku vyvolanú 5-FU môžu byť sprostredkované črevnou mikroflórou. Stále však nie je známe, či by AM a PG samotné a v kombinácii mohli zabrániť hnačke vyvolanej 5-FU moduláciou črevnej mikroflóry.
Aby sme preskúmali účinky proti hnačke a základný mechanizmus AM a PG, použili sme 5-FU na simuláciu modelu hnačky u myší. Tu sme sa zamerali na potenciálne účinky jednorazového a kombinovaného podávania (AP).Atractylodes macrocephalaesenciálny olej (AMO) aPanax ginsengcelkové saponíny (PGS), aktívne zložky extrahované z AM a PG, na hnačku, črevnú patológiu a mikrobiálnu štruktúru po chemoterapii 5-FU.
-
100% čistý prírodný esenciálny olej Eucommiae Foliuml Oil pre starostlivosť o pleť
Eucommia ulmoides(EÚ) (bežne nazývané „Du Zhong“ v čínskom jazyku) patria do čeľade Eucommiaceae, rodu malého stromu pochádzajúceho zo strednej Číny [1]. Táto rastlina je široko pestovaná v Číne vo veľkom meradle kvôli jej liečivému významu. Z EÚ bolo izolovaných asi 112 zlúčenín, medzi ktoré patria lignany, iridoidy, fenoly, steroidy a ďalšie zlúčeniny. Doplnková bylinná receptúra tejto rastliny (napríklad lahodný čaj) preukázala niektoré liečivé vlastnosti. List EÚ má vyššiu aktivitu súvisiacu s kôrou, kvetom a ovocím [2,3]. Uvádza sa, že listy EÚ zvyšujú silu kostí a telesné svaly [4], čo vedie k dlhovekosti a podporuje plodnosť u ľudí [5]. Uvádza sa, že lahodná receptúra čaju vyrobeného z listov EÚ znižuje mastnotu a zlepšuje energetický metabolizmus. Uvádza sa, že flavonoidové zlúčeniny (ako je rutín, kyselina chlorogenová, kyselina ferulová a kyselina kávová) vykazujú antioxidačnú aktivitu v listoch EÚ.6].
Hoci existuje dostatok literatúry o fytochemických vlastnostiach EÚ, existuje len málo štúdií o farmakologických vlastnostiach rôznych zlúčenín extrahovaných z kôry, semien, stoniek a listov EÚ. Tento prehľadový dokument objasní podrobné informácie o rôznych zlúčeninách extrahovaných z rôznych častí (kôry, semená, stonky a listy) v EÚ a o perspektívnom použití týchto zlúčenín vo vlastnostiach podporujúcich zdravie s vedeckými líniami dôkazov, a tak poskytne referenčný materiál. pre aplikáciu EÚ.
-
Čistý prírodný olej Houttuynia cordata Houttuynia Cordata Oil Lchthammolum Oil
Vo väčšine rozvojových krajín sa 70 – 95 % populácie spolieha na tradičné lieky v rámci primárnej zdravotnej starostlivosti a z nich 85 % ľudí používa ako účinnú látku rastliny alebo ich extrakty.[1] Hľadanie nových biologicky aktívnych zlúčenín z rastlín zvyčajne závisí od špecifických etnických a ľudových informácií získaných od miestnych odborníkov a stále sa považuje za dôležitý zdroj pre objavovanie liekov. V Indii je približne 2000 liekov rastlinného pôvodu.[2] Vzhľadom na široký záujem o používanie liečivých rastlín sa tento prehľad týkaHouttuynia cordataThunb. poskytuje aktuálne informácie s odkazom na botanické, komerčné, etnofarmakologické, fytochemické a farmakologické štúdie, ktoré sa objavujú v literatúre.H. cordataThunb. patrí do rodinySauuraceaea je bežne známy ako chvost čínskej jašterice. Je to trváca bylina so stolonovitým podzemkom s dvoma odlišnými chemotypmi.[3,4] Čínsky chemotyp tohto druhu sa vyskytuje v divokých a polodivokých podmienkach na severovýchode Indie od apríla do septembra.[5,6,7]H. cordataje dostupný v Indii, najmä v údolí Brahmaputra Assam a je využívaný rôznymi kmeňmi Assam vo forme zeleniny, ako aj na rôzne liečebné účely tradične.
-
100% PureArctium lappa olej Výrobca – Natural Lime Arctium lappa olej s certifikátmi zabezpečenia kvality
Výhody pre zdravie
Koreň lopúcha sa často konzumuje, no dá sa aj sušiť a namáčať do čaju. Dobre funguje ako zdroj inulínu, aprebiotikumvláknina, ktorá podporuje trávenie a zlepšuje zdravie čriev. Okrem toho tento koreň obsahuje flavonoidy (živiny rastlín),fytochemikáliea antioxidanty, o ktorých je známe, že majú zdravotné výhody.
Okrem toho môže koreň lopúcha poskytnúť ďalšie výhody, ako napríklad:
Znížte chronický zápal Koreň lopúcha obsahuje množstvo antioxidantov, ako je kvercetín, fenolové kyseliny a luteolín, ktoré môžu pomôcť chrániť vaše bunky predvoľných radikálov. Tieto antioxidanty pomáhajú znižovať zápal v celom tele.
Zdravotné riziká
Koreň lopúcha sa považuje za bezpečný na jedenie alebo pitie ako čaj. Táto rastlina sa však veľmi podobá na rastliny belladonna nočného, ktoré sú toxické. Odporúča sa kupovať koreň lopúcha iba od dôveryhodných predajcov a zdržať sa jeho vlastného zberu. Okrem toho existuje len minimum informácií o jeho účinkoch na deti alebo tehotné ženy. Pred použitím koreňa lopúcha u detí alebo ak ste tehotná, sa poraďte so svojím lekárom.
Tu sú niektoré ďalšie možné zdravotné riziká, ktoré je potrebné zvážiť pri použití koreňa lopúcha:
Zvýšená dehydratácia
Koreň lopúcha pôsobí ako prírodné diuretikum, čo môže viesť k dehydratácii. Ak užívate vodné pilulky alebo iné diuretiká, nemali by ste užívať koreň lopúcha. Ak užívate tieto lieky, je dôležité si uvedomiť aj iné lieky, bylinky a zložky, ktoré môžu viesť k dehydratácii.
Alergická Reakcia
Ak ste citlivý alebo máte v minulosti alergické reakcie na sedmokrásky, ambróziu alebo chryzantémy, máte zvýšené riziko alergickej reakcie na koreň lopúcha.
-
Veľkoobchodná cena 100% Čistý olej AsariRadix Et Rhizoma Relax Aromaterapia Eucalyptus globulus
Štúdie na zvieratách a in vitro skúmali potenciálne antifungálne, protizápalové a kardiovaskulárne účinky sassafrasu a jeho zložiek. Chýbajú však klinické štúdie a sassafras sa nepovažuje za bezpečný na použitie. Safrol, hlavná zložka kôry a oleja z koreňa sassafras, bol zakázaný americkým Úradom pre kontrolu potravín a liečiv (FDA), a to aj na použitie ako príchuť alebo vôňa, a nemal by sa používať interne ani externe, pretože je potenciálne karcinogénny. Safrol sa použil pri nelegálnej výrobe 3,4-metyléndioxymetamfetamínu (MDMA), známeho aj pod názvami ulíc „extáza“ alebo „Molly“, a predaj safrolu a sassafrasového oleja monitoruje americký Úrad pre kontrolu drog.
-
Veľkoobchodná cena 100% Čistý esenciálny olej Stellariae Radix (nový) Relax Aromaterapia Eucalyptus globulus
Čínsky liekopis (vydanie z roku 2020) vyžaduje, aby metanolový extrakt YCH nemal byť nižší ako 20,0 % [2], bez špecifikovaných iných ukazovateľov hodnotenia kvality. Výsledky tejto štúdie ukazujú, že obsahy metanolových extraktov voľne žijúcich a kultivovaných vzoriek spĺňali štandardy liekopisu a nebol medzi nimi žiadny významný rozdiel. Preto nebol podľa tohto indexu zjavný rozdiel v kvalite medzi divokými a kultivovanými vzorkami. Avšak obsah celkových sterolov a celkových flavonoidov vo vzorkách z divokej prírody bol výrazne vyšší ako v kultivovaných vzorkách. Ďalšia metabolomická analýza odhalila bohatú diverzitu metabolitov medzi divokými a kultivovanými vzorkami. Okrem toho sa vyšetrilo 97 významne odlišných metabolitov, ktoré sú uvedené vDoplnková tabuľka S2. Medzi tieto výrazne odlišné metabolity patrí β-sitosterol (ID je M397T42) a deriváty kvercetínu (M447T204_2), o ktorých sa uvádza, že sú účinnými zložkami. Predtým neohlásené zložky, ako trigonelín (M138T291_2), betaín (M118T277_2), fustin (M269T36), rotenón (M241T189), arctiín (M557T165) a kyselina logánová (M399T284_2), boli tiež zahrnuté medzi diferenciálne metabolity. Tieto zložky hrajú rôzne úlohy pri antioxidačnej, protizápalovej, vychytávaní voľných radikálov, v boji proti rakovine a liečbe aterosklerózy, a preto môžu predstavovať predpokladané nové aktívne zložky v YCH. Obsah účinných látok určuje účinnosť a kvalitu liečivých materiálov [7]. Stručne povedané, metanolový extrakt ako jediný index hodnotenia kvality YCH má určité obmedzenia a je potrebné ďalej skúmať konkrétnejšie ukazovatele kvality. Medzi divokým a kultivovaným YCH boli významné rozdiely v celkových steroloch, celkových flavonoidoch a obsahoch mnohých iných rozdielnych metabolitov; takže medzi nimi boli potenciálne určité rozdiely v kvalite. Zároveň novoobjavené potenciálne aktívne zložky v YCH môžu mať dôležitú referenčnú hodnotu pre štúdium funkčného základu YCH a ďalší rozvoj zdrojov YCH.
Význam pravých liečivých materiálov je už dlho uznávaný v špecifickom regióne pôvodu pre výrobu čínskych bylinných liekov vynikajúcej kvality [8]. Vysoká kvalita je základným atribútom pravých liečivých materiálov a biotop je dôležitým faktorom ovplyvňujúcim kvalitu takýchto materiálov. Odkedy sa YCH začal používať ako liek, dlho v ňom dominoval divoký YCH. Po úspešnom zavedení a domestikácii YCH v Ningxia v 80. rokoch 20. storočia sa zdroj liečivých materiálov Yinchaihu postupne presunul z divokého na kultivovaný YCH. Podľa predchádzajúceho vyšetrovania zdrojov YCH [9] a terénnom výskume našej výskumnej skupiny existujú významné rozdiely v distribučných oblastiach pestovaných a divokých liečivých materiálov. Divoký YCH sa vyskytuje hlavne v autonómnej oblasti Ningxia Hui v provincii Shaanxi, ktorá susedí so suchou zónou Vnútorného Mongolska a centrálnej Ningxie. Najmä púštna step v týchto oblastiach je najvhodnejším biotopom pre rast YCH. Na rozdiel od toho, kultivovaný YCH je distribuovaný hlavne na juh od voľnej distribučnej oblasti, ako je okres Tongxin (kultivovaný I) a jeho okolité oblasti, ktoré sa stali najväčšou pestovateľskou a výrobnou základňou v Číne, a okres Pengyang (kultivovaný II) , ktorá sa nachádza v južnejšej oblasti a je ďalšou produkčnou oblasťou pestovania YCH. Navyše, biotopy vyššie uvedených dvoch kultivovaných oblastí nie sú púštnou stepou. Preto sú okrem spôsobu produkcie výrazné rozdiely aj v biotope voľne žijúcich a pestovaných YCH. Biotop je dôležitým faktorom ovplyvňujúcim kvalitu rastlinných liečivých materiálov. Rôzne biotopy ovplyvnia tvorbu a akumuláciu sekundárnych metabolitov v rastlinách, čím ovplyvnia kvalitu liečivých prípravkov [10,11]. Preto významné rozdiely v obsahu celkových flavonoidov a celkových sterolov a expresie 53 metabolitov, ktoré sme našli v tejto štúdii, môžu byť výsledkom terénneho manažmentu a rozdielov v biotopoch.Jedným z hlavných spôsobov, ako životné prostredie ovplyvňuje kvalitu liečivých materiálov, je pôsobenie stresu na zdrojové rastliny. Mierny environmentálny stres má tendenciu stimulovať akumuláciu sekundárnych metabolitov [12,13]. Hypotéza rovnováhy medzi rastom a diferenciáciou uvádza, že keď je dostatok živín, rastliny primárne rastú, zatiaľ čo keď je živín nedostatok, rastliny sa hlavne diferencujú a produkujú viac sekundárnych metabolitov [14]. Stres zo sucha spôsobený nedostatkom vody je hlavným environmentálnym stresom, ktorému čelia rastliny v suchých oblastiach. V tejto štúdii je vodný stav pestovaného YCH hojnejší, s ročnými hladinami zrážok výrazne vyššími ako v prípade divokých YCH (zásoba vody pre kultivovaný I bol asi 2-krát väčší ako vo voľnej prírode; kultivovaný II bol asi 3,5-krát vyšší ako vo voľnej prírode ). Okrem toho pôda vo voľnej prírode je piesčitá, ale pôda v poľnohospodárskej pôde je hlinitá. V porovnaní s hlinou má piesčitá pôda slabú schopnosť zadržiavať vodu a je pravdepodobnejšie, že zhorší stres zo sucha. Zároveň bol proces pestovania často sprevádzaný zálievkou, takže stupeň stresu zo sucha bol nízky. Divoký YCH rastie v drsných prírodných suchých biotopoch, a preto môže trpieť závažnejším stresom zo sucha.Osmoregulácia je dôležitý fyziologický mechanizmus, ktorým sa rastliny vyrovnávajú so stresom zo sucha a alkaloidy sú dôležité osmotické regulátory vyšších rastlín [15]. Betaíny sú vo vode rozpustné alkaloidné kvartérne amóniové zlúčeniny a môžu pôsobiť ako osmoprotektanty. Stres zo sucha môže znížiť osmotický potenciál buniek, zatiaľ čo osmoprotektanty zachovávajú a udržiavajú štruktúru a integritu biologických makromolekúl a účinne zmierňujú poškodenie rastlín spôsobené stresom zo sucha.16]. Napríklad pri strese zo sucha sa obsah betaínu v cukrovej repe a Lycium barbarum výrazne zvýšil [17,18]. Trigonelín je regulátorom bunkového rastu a pri strese zo sucha môže predĺžiť dĺžku bunkového cyklu rastliny, inhibovať rast buniek a viesť k zmenšeniu objemu buniek. Relatívne zvýšenie koncentrácie rozpustenej látky v bunke umožňuje rastline dosiahnuť osmotickú reguláciu a zvýšiť jej schopnosť odolávať stresu zo sucha.19]. JIA X [20] zistili, že s nárastom stresu zo sucha produkuje Astragalus membranaceus (zdroj tradičnej čínskej medicíny) viac trigonelínu, ktorý pôsobí na reguláciu osmotického potenciálu a zlepšuje schopnosť odolávať stresu zo sucha. Ukázalo sa tiež, že flavonoidy zohrávajú dôležitú úlohu pri odolnosti rastlín voči stresu zo sucha [21,22]. Veľké množstvo štúdií potvrdilo, že mierny stres zo sucha prispieval k hromadeniu flavonoidov. Lang Duo-Yong a kol. [23] porovnával účinky stresu zo sucha na YCH kontrolou schopnosti zadržiavať vodu na poli. Zistilo sa, že stres zo sucha do určitej miery inhiboval rast koreňov, ale pri strednom a silnom strese zo sucha (40 % poľná kapacita zadržiavania vody) sa celkový obsah flavonoidov v YCH zvýšil. Medzitým pri strese zo sucha môžu fytosteroly pôsobiť tak, že regulujú fluiditu a priepustnosť bunkových membrán, inhibujú stratu vody a zlepšujú odolnosť voči stresu [24,25]. Preto zvýšená akumulácia celkových flavonoidov, celkových sterolov, betaínu, trigonelínu a iných sekundárnych metabolitov v divokom YCH môže súvisieť so stresom zo sucha s vysokou intenzitou.V tejto štúdii sa analýza obohatenia KEGG dráhy uskutočnila na metabolitoch, o ktorých sa zistilo, že sa výrazne líšia medzi divokým a kultivovaným YCH. Obohatené metabolity zahŕňali tie, ktoré sa podieľajú na dráhach metabolizmu askorbátu a aldarátu, biosyntéze aminoacyl-tRNA, metabolizme histidínu a metabolizmu beta-alanínu. Tieto metabolické dráhy úzko súvisia s mechanizmami odolnosti rastlín voči stresu. Medzi nimi metabolizmus askorbátu hrá dôležitú úlohu pri produkcii antioxidantov v rastlinách, metabolizme uhlíka a dusíka, odolnosti voči stresu a iných fyziologických funkciách [26]; Biosyntéza aminoacyl-tRNA je dôležitou cestou pre tvorbu proteínov [27,28], ktorý sa podieľa na syntéze proteínov odolných voči stresu. Histidínové aj β-alanínové dráhy môžu zvýšiť toleranciu rastlín voči environmentálnemu stresu [29,30]. To ďalej naznačuje, že rozdiely v metabolitoch medzi divokým a kultivovaným YCH úzko súviseli s procesmi odolnosti voči stresu.Pôda je materiálnym základom pre rast a vývoj liečivých rastlín. Dusík (N), fosfor (P) a draslík (K) v pôde sú dôležitými živinami pre rast a vývoj rastlín. Pôdna organická hmota obsahuje aj N, P, K, Zn, Ca, Mg a ďalšie makroprvky a stopové prvky potrebné pre liečivé rastliny. Nadmerné alebo nedostatočné živiny alebo nevyvážené pomery živín ovplyvnia rast a vývoj a kvalitu liečivých materiálov a rôzne rastliny majú rôzne požiadavky na živiny [31,32,33]. Napríklad nízky N stres podporoval syntézu alkaloidov v Isatis indigotica a bol prospešný pre akumuláciu flavonoidov v rastlinách, ako je Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge a Dichondra repens Forst. Na rozdiel od toho príliš veľa N inhibovalo akumuláciu flavonoidov u druhov ako Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis a Ginkgo biloba a ovplyvnilo kvalitu liečivých materiálov.34]. Aplikácia hnojiva P bola účinná na zvýšenie obsahu kyseliny glycyrizínovej a dihydroacetónu v lykožrúte uralskom [35]. Keď aplikačné množstvo presiahlo 0,12 kg·m−2, celkový obsah flavonoidov v Tussilago farfara klesol [36]. Aplikácia hnojiva P mala negatívny vplyv na obsah polysacharidov v tradičnej čínskej medicíne rhizoma polygonati [37], ale hnojivo K bolo účinné pri zvyšovaní obsahu saponínov [38]. Aplikácia 450 kg·hm−2 K hnojiva bola najlepšia pre rast a akumuláciu saponínov dvojročného Panax notoginseng [39]. Pri pomere N:P:K = 2:2:1 boli celkové množstvá hydrotermálneho extraktu, harpagidu a harpagosidu najvyššie [40]. Vysoký pomer N, P a K bol prospešný na podporu rastu Pogostemon cablin a zvýšenie obsahu prchavého oleja. Nízky pomer N, P a K zvýšil obsah hlavných účinných zložiek oleja zo stonkových listov Pogostemon cablin [41]. YCH je rastlina tolerantná k neplodnej pôde a môže mať špecifické požiadavky na živiny, ako sú N, P a K. V tejto štúdii bola pôda divokých rastlín YCH v porovnaní s pestovanou YCH relatívne neplodná: obsah pôdy organickej hmoty, celkový N, celkový P a celkový K boli asi 1/10, 1/2, 1/3 a 1/3 v porovnaní s pestovanými rastlinami. Preto môžu byť rozdiely v pôdnych živinách ďalším dôvodom rozdielov medzi metabolitmi zistenými v kultivovanom a divokom YCH. Weibao Ma a kol. [42] zistili, že aplikácia určitého množstva N hnojiva a P hnojiva výrazne zlepšila úrodu a kvalitu semien. Vplyv živných prvkov na kvalitu YCH však nie je jasný a opatrenia na hnojenie na zlepšenie kvality liečivých materiálov si vyžadujú ďalšie štúdium.Čínske bylinné lieky majú vlastnosti „Priaznivé biotopy podporujú výnos a nepriaznivé biotopy zlepšujú kvalitu“ [43]. V procese postupného prechodu od divokých k pestovaným YCH sa biotop rastlín zmenil zo suchej a neúrodnej púštnej stepi na úrodnú poľnohospodársku pôdu s výdatnejším množstvom vody. Biotop pestovaného YCH je lepší a výnos je vyšší, čo pomáha uspokojiť dopyt trhu. Tento vynikajúci biotop však viedol k významným zmenám v metabolitoch YCH; či to vedie k zlepšeniu kvality YCH a ako dosiahnuť vysokokvalitnú produkciu YCH prostredníctvom vedecky podložených pestovateľských opatrení si bude vyžadovať ďalší výskum.Simulačné pestovanie biotopov je metóda simulácie biotopu a podmienok prostredia voľne rastúcich liečivých rastlín, založená na znalostiach o dlhodobej adaptácii rastlín na špecifické environmentálne stresy.43]. Simuláciou rôznych environmentálnych faktorov, ktoré ovplyvňujú voľne žijúce rastliny, najmä pôvodný biotop rastlín používaných ako zdroje autentických liečivých materiálov, tento prístup využíva vedecký dizajn a inovatívne ľudské zásahy na vyváženie rastu a sekundárneho metabolizmu čínskych liečivých rastlín [43]. Cieľom metód je dosiahnuť optimálne usporiadanie pre vývoj vysokokvalitných liečivých materiálov. Simulačná kultivácia biotopov by mala poskytnúť efektívny spôsob pre vysokokvalitnú produkciu YCH, aj keď farmakodynamický základ, markery kvality a mechanizmy odozvy na environmentálne faktory sú nejasné. V súlade s tým navrhujeme, aby sa opatrenia vedeckého návrhu a manažmentu v teréne pri pestovaní a produkcii YCH vykonávali s ohľadom na environmentálne charakteristiky voľne žijúcich YCH, ako sú suché, neplodné a piesčité pôdne podmienky. Zároveň sa tiež dúfa, že výskumníci budú vykonávať hlbší výskum na báze funkčných materiálov a kvalitatívnych markerov YCH. Tieto štúdie môžu poskytnúť efektívnejšie hodnotiace kritériá pre YCH a podporiť vysokokvalitnú výrobu a trvalo udržateľný rozvoj priemyslu. -
Herbal Fructus Amomi olej Prírodná masáž Difuzéry 1kg Amomum villosum Esenciálny olej
Čeľaď Zingiberaceae priťahuje čoraz väčšiu pozornosť v alelopatických výskumoch kvôli bohatým prchavým olejom a aromatickosti jej členov. Predchádzajúci výskum ukázal, že chemikálie z Curcuma zedoaria (zedoary) [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] a Zingiber officinale Rosc. [42] z čeľade zázvorovitých majú alelopatické účinky na klíčenie semien a rast sadeníc kukurice, šalátu a paradajok. Naša súčasná štúdia je prvou správou o alelopatickej aktivite prchavých látok zo stoniek, listov a mladých plodov A. villosum (člen čeľade Zingiberaceae). Výťažok oleja zo stoniek, listov a mladých plodov bol 0,15 %, 0,40 % a 0,50 %, čo naznačuje, že plody produkovali väčšie množstvo prchavých olejov ako stonky a listy. Hlavnými zložkami prchavých olejov zo stoniek boli β-pinén, β-felandrén a α-pinén, čo bol vzor podobný vzoru hlavných chemikálií listového oleja, β-pinénu a α-pinénu (monoterpénové uhľovodíky). Na druhej strane, olej v mladých plodoch bol bohatý na bornylacetát a gáfor (okysličené monoterpény). Výsledky boli podporené zisteniami Do N Dai [30,32] a Hui Ao [31], ktorí identifikovali oleje z rôznych orgánov A. villosum.
Existuje niekoľko správ o inhibičných účinkoch týchto hlavných zlúčenín na rast rastlín u iných druhov. Shalinder Kaur zistil, že α-pinén z eukalyptu výrazne potláča dĺžku koreňa a výšku výhonkov Amaranthus viridis L. pri koncentrácii 1,0 μl [43] a ďalšia štúdia ukázala, že α-pinén inhiboval skorý rast koreňov a spôsobil oxidačné poškodenie koreňového tkaniva prostredníctvom zvýšenej tvorby reaktívnych foriem kyslíka [44]. Niektoré správy tvrdili, že β-pinén inhiboval klíčenie a rast sadeníc testovaných burín spôsobom závislým od dávky tým, že narušil integritu membrány.45], ktorá mení biochémiu rastlín a zvyšuje aktivitu peroxidáz a polyfenoloxidáz [46]. β-Phellandrene vykazoval maximálnu inhibíciu klíčenia a rastu Vigna unguiculata (L.) Walp pri koncentrácii 600 ppm [47], pričom pri koncentrácii 250 mg/m3 gáfor potláčal rast korienkov a výhonkov Lepidium sativum L. [48]. Výskumy uvádzajúce alelopatický účinok bornylacetátu sú však obmedzené. V našej štúdii boli alelopatické účinky β-pinénu, bornylacetátu a gáfru na dĺžku koreňa slabšie ako v prípade prchavých olejov s výnimkou α-pinénu, zatiaľ čo listový olej bohatý na α-pinén bol tiež fytotoxickejší ako zodpovedajúci prchavý olej. oleje zo stoniek a plodov A. villosum, pričom oba nálezy naznačujú, že α-pinén by mohol byť dôležitou chemikáliou pre alelopatiu tohto druhu. Výsledky zároveň naznačili, že niektoré zlúčeniny v ovocnom oleji, ktoré neboli v hojnom množstve, by mohli prispieť k vytvoreniu fytotoxického účinku, čo je zistenie, ktoré si v budúcnosti vyžaduje ďalší výskum.Za normálnych podmienok je alelopatický účinok alelochemikálií druhovo špecifický. Jiang a kol. zistili, že esenciálny olej produkovaný Artemisia sieversiana mal silnejší účinok na Amaranthus retroflexus L. ako na Medicago sativa L., Poa annua L. a Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng. [49]. V inej štúdii bol prchavý olej z Lavandula angustifolia Mill. vyvolali rôzne stupne fytotoxických účinkov na rôzne druhy rastlín. Lolium multiflorum Lam. bol najcitlivejším akceptorovým druhom, pričom rast hypokotylu a koreňa bol inhibovaný o 87,8 % a 76,7 %, v uvedenom poradí, pri dávke 1 μl/ml olejov, ale rast hypokotylu u sadeníc uhoriek bol sotva ovplyvnený [20]. Naše výsledky tiež ukázali, že medzi L. sativa a L. perenne bol rozdiel v citlivosti na prchavé látky A. villosum.Prchavé zlúčeniny a éterické oleje toho istého druhu sa môžu kvantitatívne a/alebo kvalitatívne líšiť v dôsledku podmienok rastu, častí rastlín a metód detekcie. Napríklad správa preukázala, že pyranoid (10,3 %) a β-karyofylén (6,6 %) boli hlavnými zlúčeninami prchavých látok emitovaných z listov Sambucus nigra, zatiaľ čo benzaldehyd (17,8 %), α-bulnezén (16,6 %) a tetrakozán (11,5 %) boli bohaté na oleje extrahované z listov [50]. V našej štúdii mali prchavé zlúčeniny uvoľňované čerstvými rastlinnými materiálmi silnejšie alelopatické účinky na testované rastliny ako extrahované prchavé oleje, pričom rozdiely v reakcii úzko súvisia s rozdielmi v alelochemikáliách prítomných v týchto dvoch prípravkoch. Presné rozdiely medzi prchavými zlúčeninami a olejmi je potrebné ďalej skúmať v nasledujúcich experimentoch.Rozdiely v mikrobiálnej diverzite a štruktúre mikrobiálneho spoločenstva vo vzorkách pôdy, do ktorých boli pridané prchavé oleje, súviseli s konkurenciou medzi mikroorganizmami, ako aj s akýmikoľvek toxickými účinkami a trvaním prchavých olejov v pôde. Vokou a Liotiri [51] zistili, že príslušná aplikácia štyroch esenciálnych olejov (0,1 ml) do kultivovanej pôdy (150 g) aktivovala dýchanie vzoriek pôdy, dokonca aj oleje sa líšili v ich chemickom zložení, čo naznačuje, že rastlinné oleje sa používajú ako zdroj uhlíka a energie. vyskytujúce sa pôdne mikroorganizmy. Údaje získané zo súčasnej štúdie potvrdili, že oleje z celej rastliny A. villosum prispeli k zjavnému zvýšeniu počtu druhov pôdnych húb do 14. dňa po pridaní oleja, čo naznačuje, že olej môže byť zdrojom uhlíka pre viac pôdne huby. Ďalšia štúdia uvádza zistenie: pôdne mikroorganizmy obnovili svoju pôvodnú funkciu a biomasu po dočasnom období zmien vyvolaných pridaním oleja Thymbra capitata L. (Cav), ale olej v najvyššej dávke (0,93 µl oleja na gram pôdy) neumožnil pôdnym mikroorganizmom obnoviť pôvodnú funkčnosť [52]. V súčasnej štúdii sme na základe mikrobiologickej analýzy pôdy po ošetrení rôznymi dňami a rôznymi koncentráciami predpokladali, že komunita pôdnych baktérií sa zotaví po viacerých dňoch. Naproti tomu hubová mikroflóra sa nemôže vrátiť do pôvodného stavu. Nasledujúce výsledky potvrdzujú túto hypotézu: zreteľný vplyv vysokej koncentrácie oleja na zloženie pôdneho hubového mikrobiómu odhalila analýza hlavných súradníc (PCoA) a prezentácie tepelnej mapy opäť potvrdili, že zloženie hubového spoločenstva v pôde ošetrené 3,0 mg/ml oleja (konkrétne 0,375 mg oleja na gram pôdy) na úrovni rodu sa značne líšili od iných ošetrení. V súčasnosti je výskum o účinkoch pridávania monoterpénových uhľovodíkov alebo okysličených monoterpénov na pôdnu mikrobiálnu diverzitu a štruktúru spoločenstiev stále vzácny. Niekoľko štúdií uvádza, že α-pinén zvýšil pôdnu mikrobiálnu aktivitu a relatívny výskyt Methylophilaceae (skupina metylotrofov, Proteobacteria) pri nízkom obsahu vlhkosti, čo hrá dôležitú úlohu ako zdroj uhlíka v suchších pôdach.53]. Podobne prchavý olej z celej rastliny A. villosum, obsahujúci 15,03 % α-pinénu (Doplnková tabuľka S1), zjavne zvýšil relatívny počet proteobaktérií na 1, 5 mg / ml a 3, 0 mg / ml, čo naznačuje, že a-pinén môže pôsobiť ako jeden zo zdrojov uhlíka pre pôdne mikroorganizmy.Prchavé zlúčeniny produkované rôznymi orgánmi A. villosum mali rôzne stupne alelopatických účinkov na L. sativa a L. perenne, čo úzko súviselo s chemickými zložkami, ktoré časti rastlín A. villosum obsahovali. Hoci chemické zloženie prchavého oleja bolo potvrdené, prchavé zlúčeniny uvoľňované A. villosum pri izbovej teplote nie sú známe, čo si vyžaduje ďalšie skúmanie. Okrem toho je potrebné zvážiť aj synergický účinok medzi rôznymi alelochemikáliami. Pokiaľ ide o pôdne mikroorganizmy, aby sme mohli komplexne preskúmať účinok prchavého oleja na pôdne mikroorganizmy, stále musíme vykonať hlbší výskum: predĺžiť čas spracovania prchavého oleja a rozpoznať variácie v chemickom zložení prchavého oleja v pôde. v rôznych dňoch. -
Čistý olej Artemisia capillaris na výrobu sviečok a mydla veľkoobchodný esenciálny olej do difúzorov nový pre difuzéry na trstinové horáky
Dizajn modelu hlodavcov
Zvieratá boli náhodne rozdelené do piatich skupín po pätnástich myšiach. Kontrolnej skupine a modelovej skupine sa myši podali žalúdočnou sondousezamový olejna 6 dní. Myšiam v pozitívnej kontrolnej skupine sa podávali žalúdočnou sondou bifendátové tablety (BT, 10 mg/kg) počas 6 dní. Experimentálne skupiny boli liečené 100 mg/kg a 50 mg/kg AEO rozpusteným v sezamovom oleji počas 6 dní. Na 6. deň bola kontrolná skupina ošetrená sezamovým olejom a všetky ostatné skupiny boli ošetrené jednou dávkou 0,2 % CCl4 v sezamovom oleji (10 ml/kg).intraperitoneálna injekcia. Myši sa potom hladovali bez vody a vzorky krvi sa odoberali z retrobulbárnych ciev; odobratá krv bola centrifugovaná pri 3000 xg10 minút, aby sa oddelilo sérum.Cervikálna dislokáciasa vykonalo ihneď po odbere krvi a vzorky pečene sa okamžite odobrali. Jedna časť vzorky pečene sa okamžite skladovala pri -20 °C až do analýzy a ďalšia časť sa vyrezala a fixovala v 10 %formalínriešenie; zostávajúce tkanivá sa skladovali pri teplote -80 °C na histopatologickú analýzu (Wang a kol., 2008,Hsu a kol., 2009,Nie a kol., 2015).
Meranie biochemických parametrov v sére
Poškodenie pečene bolo hodnotené odhadomenzymatické aktivitysérovej ALT a AST s použitím zodpovedajúcich komerčných súprav podľa pokynov pre súpravy (Nanjing, provincia Jiangsu, Čína). Enzymatické aktivity boli vyjadrené ako jednotky na liter (U/l).
Meranie MDA, SOD, GSH a GSH-Pxv pečeňových homogenátoch
Pečeňové tkanivá sa homogenizovali studeným fyziologickým roztokom v pomere 1:9 (hmotnosť/objem, pečeň:fyziologický roztok). Homogenáty sa centrifugovali (2500 xgpočas 10 minút), aby sa zozbierali supernatanty na následné stanovenia. Poškodenie pečene bolo hodnotené podľa pečeňových meraní hladín MDA a GSH, ako aj SOD a GSH-Pxčinnosti. Všetky tieto boli stanovené podľa pokynov na súprave (Nanjing, provincia Jiangsu, Čína). Výsledky pre MDA a GSH boli vyjadrené ako nmol na mg proteínu (nmol/mg prot) a aktivity SOD a GSH-Pxboli vyjadrené ako U na mg proteínu (U/mg prot).
Histopatologická analýza
Časti čerstvo získanej pečene sa fixovali v 10 % pufriparaformaldehydfosfátový roztok. Vzorka sa potom vložila do parafínu, nakrájala na 3–5 μm rezy a zafarbila sahematoxylínaeozín(H&E) podľa štandardného postupu a nakoniec analyzované pomocousvetelná mikroskopia(Tian a kol., 2012).
Štatistická analýza
Výsledky boli vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka (SD). Výsledky boli analyzované pomocou štatistického programu SPSS Statistics, verzia 19.0. Údaje boli podrobené analýze rozptylu (ANOVA,p< 0,05), po ktorom nasledoval Dunnettov test a Dunnettov T3 test na stanovenie štatisticky významných rozdielov medzi hodnotami rôznych experimentálnych skupín. Významný rozdiel sa považoval na úrovnip< 0,05.
Výsledky a diskusia
Zložky AEO
Na základe analýzy GC/MS sa zistilo, že AEO obsahuje 25 zložiek eluovaných od 10 do 35 minút a identifikovalo sa 21 zložiek, ktoré predstavujú 84 % esenciálneho oleja (Tabuľka 1). Obsiahnutý prchavý olejmonoterpenoidy(80,9 %), seskviterpenoidy (9,5 %), nasýtené nerozvetvené uhľovodíky (4,86 %) a rôzny acetylén (4,86 %). V porovnaní s inými štúdiami (Guo a kol., 2004), našli sme v AEO hojné monoterpenoidy (80,90 %). Výsledky ukázali, že najhojnejšou zložkou AEO je β-citronellol (16,23 %). Medzi ďalšie hlavné zložky AEO patrí 1,8-cineol (13,9 %),gáfor(12,59 %),linalool(11,33 %), α-pinén (7,21 %), β-pinén (3,99 %),tymol(3,22 %) amyrcen(2,02 %). Zmeny v chemickom zložení môžu súvisieť s podmienkami prostredia, ktorým bola rastlina vystavená, ako je minerálna voda, slnečné svetlo, štádium vývoja avýživy.
-
Čistý olej Saposhnikovia divaricata na výrobu sviečok a mydla veľkoobchodný esenciálny olej do difúzorov nový pre difuzéry na trstinové horáky
2.1. Príprava SDE
Oddenky SD boli zakúpené ako sušená bylina od Hanherb Co. (Guri, Kórea). Rastlinné materiály taxonomicky potvrdil Dr. Go-Ya Choi z Kórejského inštitútu orientálnej medicíny (KIOM). Vzor poukážky (číslo 2014 SDE-6) bol uložený v Kórejskom herbári štandardných rastlinných zdrojov. Sušené rizómy SD (320 g) sa dvakrát extrahovali 70 % etanolom (s 2 hodinovým refluxom) a extrakt sa potom zahustil pri zníženom tlaku. Odvar sa prefiltroval, lyofilizoval a skladoval pri 4 °C. Výťažok vysušeného extraktu zo surových východiskových materiálov bol 48,13 % (hmotn./hmotn.).
2.2. Kvantitatívna vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) analýza
Chromatografická analýza sa uskutočnila pomocou systému HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) a detektora fotodiódového poľa. Pre HPLC analýzu SDE, prim-O-štandard glukozylcimifugínu bol zakúpený od Kórejského propagačného inštitútu pre priemysel tradičnej medicíny (Gyeongsan, Kórea) asek-O-glukozylhamaudol a 4′-O-β-D-glukozyl-5-O-metylvisamminol boli izolované v našom laboratóriu a identifikované spektrálnymi analýzami, predovšetkým NMR a MS.
Vzorky SDE (0,1 mg) sa rozpustili v 70 % etanole (10 ml). Chromatografická separácia sa uskutočnila na kolóne XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Mobilná fáza pozostávala z acetonitrilu (A) a 0,1 % kyseliny octovej vo vode (B) pri prietoku 1,0 ml/min. Viackrokový gradientový program bol použitý nasledovne: 5 % A (0 min), 5 – 20 % A (0 – 10 min), 20 % A (10 – 23 min) a 20 – 65 % A (23 – 40 min. ). Detekčná vlnová dĺžka bola snímaná pri 210–400 nm a zaznamenaná pri 254 nm. Objem injekcie bol 10,0μL. Štandardné roztoky na stanovenie troch chromónov boli pripravené v konečnej koncentrácii 7,781 mg/ml (prim-O-glukozylcimifugín), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glukozyl-5-O-metylvisamminol) a 31,125 mg/ml (sek-O-glukozylhamaudol) v metanole a udržiavaný pri 4 °C.
2.3. Hodnotenie protizápalovej aktivityIn Vitro
2.3.1. Bunková kultúra a spracovanie vzoriek
Bunky RAW 264.7 boli získané z American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) a pestované v médiu DMEM obsahujúcom 1 % antibiotík a 5,5 % FBS. Bunky sa inkubovali vo zvlhčenej atmosfére 5 % C02 pri 37 °C. Na stimuláciu buniek sa médium nahradilo čerstvým médiom DMEM a lipopolysacharidom (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) pri 1μg/ml sa pridalo v prítomnosti alebo neprítomnosti SDE (200 alebo 400μg/ml) počas ďalších 24 hodín.
2.3.2. Stanovenie oxidu dusnatého (NO), prostaglandínu E2 (PGE2), faktora nekrózy nádorov-α(TNF-αa produkcia interleukínu-6 (IL-6).
Bunky boli ošetrené SDE a stimulované LPS počas 24 hodín. Produkcia NO sa analyzovala meraním dusitanov pomocou Griessovho činidla podľa predchádzajúcej štúdie [12]. Sekrécia zápalových cytokínov PGE2, TNF-αa IL-6 sa určil pomocou súpravy ELISA (R&D systems) podľa pokynov výrobcu. Účinky SDE na produkciu NO a cytokínov boli stanovené pri 540 nm alebo 450 nm pomocou Wallac EnVision™čítačka mikrodoštičiek (PerkinElmer).
2.4. Hodnotenie antiosteoartritickej aktivityIn vivo
2.4.1. Zvieratá
Samce potkanov Sprague-Dawley (vo veku 7 týždňov) boli zakúpené od Samtako Inc. (Osan, Kórea) a umiestnené za kontrolovaných podmienok s 12-hodinovým cyklom svetlo/tma pri°C a% vlhkosti. Potkanom bola poskytnutá laboratórna strava a vodaad libitum. Všetky experimentálne postupy sa uskutočňovali v súlade s pokynmi Národného inštitútu zdravia (NIH) a boli schválené Výborom pre starostlivosť o zvieratá a ich používanie na univerzite Daejeon (Daejeon, Kórejská republika).
2.4.2. Indukcia OA s MIA u potkanov
Zvieratá boli randomizované a zaradené do liečebných skupín pred začatím štúdie (za skupinu). MIA roztok (3 mg/50μL 0,9 % fyziologického roztoku) bol priamo injikovaný do intraartikulárneho priestoru pravého kolena v anestézii vyvolanej zmesou ketamínu a xylazínu. Potkany boli rozdelené náhodne do štyroch skupín: (1) skupina s fyziologickým roztokom bez injekcie MIA, (2) skupina s injekciou MIA, (3) skupina liečená SDE (200 mg/kg) s injekciou MIA a (4 skupina liečená indometacínom (IM-) (2 mg/kg) s injekciou MIA. Potkanom sa podávali orálne SDE a IM 1 týždeň pred injekciou MIA počas 4 týždňov. Dávkovanie SDE a IM použité v tejto štúdii bolo založené na dávkach použitých v predchádzajúcich štúdiách [10,13,14].
2.4.3. Merania rozloženia hmotnosti zadnej labky
Po indukcii OA bola pôvodná rovnováha v schopnosti niesť hmotnosť zadných labiek narušená. Na vyhodnotenie zmien tolerancie nosnosti sa použil prístroj na testovanie kapacity (Linton Instrumentation, Norfolk, UK). Potkany sa opatrne umiestnili do meracej komory. Sila nesúca hmotnosť, ktorú vyvinula zadná končatina, bola spriemerovaná počas 3 s. Pomer distribúcie hmotnosti sa vypočítal podľa nasledujúcej rovnice: [hmotnosť pravej zadnej končatiny/(hmotnosť pravej zadnej končatiny + hmotnosť ľavej zadnej končatiny)] x 100 [15].
2.4.4. Merania hladín cytokínov v sére
Vzorky krvi sa centrifugovali pri 1500 g počas 10 minút pri 4 °C; potom sa sérum zozbieralo a skladovalo pri -70 °C až do použitia. Hladiny IL-1β, IL-6, TNF-αa PGE2 v sére sa merali pomocou súprav ELISA od R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) podľa pokynov výrobcu.
2.4.5. Kvantitatívna RT-PCR analýza v reálnom čase
Celková RNA bola extrahovaná z tkaniva kolenného kĺbu pomocou činidla TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), reverzne transkribovaná do cDNA a amplifikovaná pomocou PCR pomocou súpravy TM One Step RT PCR so zeleným SYBR (Applied Biosystems , Grand Island, NY, USA). Kvantitatívna PCR v reálnom čase sa uskutočnila pomocou systému Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Sekvencie primérov a sekvencia sondy sú uvedené v tabuľke1. Alikvóty vzorky cDNA a rovnaké množstvo GAPDH cDNA sa amplifikovali s TaqMan® Universal PCR master zmesou obsahujúcou DNA polymerázu podľa pokynov výrobcu (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Podmienky PCR boli 2 minúty pri 50 °C, 10 minút pri 94 °C, 15 s pri 95 °C a 1 minúta pri 60 °C počas 40 cyklov. Koncentrácia cieľového génu sa stanovila pomocou porovnávacej metódy Ct (prahové číslo cyklu v krížovom bode medzi grafom amplifikácie a prahom) podľa pokynov výrobcu.
