Čistý olej Saposhnikovia divaricata na výrobu sviečok a mydla veľkoobchodný esenciálny olej do difúzorov nový pre difuzéry na trstinové horáky

Čistý olej Saposhnikovia divaricata na výrobu sviečok a mydla veľkoobchodný esenciálny olej do difuzéra nový pre difuzéry na trstinové horáky Odporúčaný obrázok

krátky popis:

2.1. Príprava SDE

Oddenky SD boli zakúpené ako sušená bylina od Hanherb Co. (Guri, Kórea). Rastlinné materiály taxonomicky potvrdil Dr. Go-Ya Choi z Kórejského inštitútu orientálnej medicíny (KIOM). Vzor poukážky (číslo 2014 SDE-6) bol uložený v Kórejskom herbári štandardných rastlinných zdrojov. Sušené rizómy SD (320 g) sa dvakrát extrahovali 70 % etanolom (s 2 hodinovým refluxom) a extrakt sa potom zahustil pri zníženom tlaku. Odvar sa prefiltroval, lyofilizoval a skladoval pri 4 °C. Výťažok vysušeného extraktu zo surových východiskových materiálov bol 48,13 % (hmotn./hmotn.).

2.2. Kvantitatívna vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) analýza

Chromatografická analýza sa uskutočnila pomocou systému HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) a detektora fotodiódového poľa. Pre HPLC analýzu SDE, prim-O-štandard glukozylcimifugínu bol zakúpený od Kórejského propagačného inštitútu pre priemysel tradičnej medicíny (Gyeongsan, Kórea) asek-O-glukozylhamaudol a 4′-O-β-D-glukozyl-5-O-metylvisamminol boli izolované v našom laboratóriu a identifikované spektrálnymi analýzami, predovšetkým NMR a MS.

Vzorky SDE (0,1 mg) sa rozpustili v 70 % etanole (10 ml). Chromatografická separácia sa uskutočnila na kolóne XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Mobilná fáza pozostávala z acetonitrilu (A) a 0,1 % kyseliny octovej vo vode (B) pri prietoku 1,0 ml/min. Viackrokový gradientový program bol použitý nasledovne: 5 % A (0 min), 5 – 20 % A (0 – 10 min), 20 % A (10 – 23 min) a 20 – 65 % A (23 – 40 min. ). Detekčná vlnová dĺžka bola snímaná pri 210–400 nm a zaznamenaná pri 254 nm. Objem injekcie bol 10,0μL. Štandardné roztoky na stanovenie troch chromónov boli pripravené v konečnej koncentrácii 7,781 mg/ml (prim-O-glukozylcimifugín), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glukozyl-5-O-metylvisamminol) a 31,125 mg/ml (sek-O-glukozylhamaudol) v metanole a udržiavaný pri 4 °C.

2.3. Hodnotenie protizápalovej aktivityIn Vitro

2.3.1. Bunková kultúra a spracovanie vzoriek

Bunky RAW 264.7 boli získané z American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) a pestované v médiu DMEM obsahujúcom 1 % antibiotík a 5,5 % FBS. Bunky sa inkubovali vo zvlhčenej atmosfére 5 % C02 pri 37 °C. Na stimuláciu buniek sa médium nahradilo čerstvým médiom DMEM a lipopolysacharidom (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) pri 1μg/ml sa pridalo v prítomnosti alebo neprítomnosti SDE (200 alebo 400μg/ml) počas ďalších 24 hodín.

2.3.2. Stanovenie oxidu dusnatého (NO), prostaglandínu E2 (PGE2), faktora nekrózy nádorov-α(TNF-αa produkcia interleukínu-6 (IL-6).

Bunky boli ošetrené SDE a stimulované LPS počas 24 hodín. Produkcia NO sa analyzovala meraním dusitanov pomocou Griessovho činidla podľa predchádzajúcej štúdie [12]. Sekrécia zápalových cytokínov PGE2, TNF-αa IL-6 sa určil pomocou súpravy ELISA (R&D systems) podľa pokynov výrobcu. Účinky SDE na produkciu NO a cytokínov boli stanovené pri 540 nm alebo 450 nm pomocou Wallac EnVision™čítačka mikrodoštičiek (PerkinElmer).

2.4. Hodnotenie antiosteoartritickej aktivityIn vivo

2.4.1. Zvieratá

Samce potkanov Sprague-Dawley (vo veku 7 týždňov) boli zakúpené od Samtako Inc. (Osan, Kórea) a umiestnené za kontrolovaných podmienok s 12-hodinovým cyklom svetlo/tma pri°C a% vlhkosti. Potkanom bola poskytnutá laboratórna strava a vodaad libitum. Všetky experimentálne postupy sa uskutočňovali v súlade s pokynmi Národného inštitútu zdravia (NIH) a boli schválené Výborom pre starostlivosť o zvieratá a ich používanie na univerzite Daejeon (Daejeon, Kórejská republika).

2.4.2. Indukcia OA s MIA u potkanov

Zvieratá boli randomizované a zaradené do liečebných skupín pred začatím štúdie (za skupinu). MIA roztok (3 mg/50μL 0,9 % fyziologického roztoku) bol priamo injikovaný do intraartikulárneho priestoru pravého kolena v anestézii vyvolanej zmesou ketamínu a xylazínu. Potkany boli rozdelené náhodne do štyroch skupín: (1) skupina s fyziologickým roztokom bez injekcie MIA, (2) skupina s injekciou MIA, (3) skupina liečená SDE (200 mg/kg) s injekciou MIA a (4 skupina liečená indometacínom (IM-) (2 mg/kg) s injekciou MIA. Potkanom sa podávali orálne SDE a IM 1 týždeň pred injekciou MIA počas 4 týždňov. Dávkovanie SDE a IM použité v tejto štúdii bolo založené na dávkach použitých v predchádzajúcich štúdiách [10,13,14].

2.4.3. Merania rozloženia hmotnosti zadnej labky

Po indukcii OA bola pôvodná rovnováha v schopnosti niesť hmotnosť zadných labiek narušená. Na vyhodnotenie zmien tolerancie nosnosti sa použil prístroj na testovanie kapacity (Linton Instrumentation, Norfolk, UK). Potkany sa opatrne umiestnili do meracej komory. Sila nesúca hmotnosť, ktorú vyvinula zadná končatina, bola spriemerovaná počas 3 s. Pomer distribúcie hmotnosti sa vypočítal podľa nasledujúcej rovnice: [hmotnosť pravej zadnej končatiny/(hmotnosť pravej zadnej končatiny + hmotnosť ľavej zadnej končatiny)] x 100 [15].

2.4.4. Merania hladín cytokínov v sére

Vzorky krvi sa centrifugovali pri 1500 g počas 10 minút pri 4 °C; potom sa sérum zozbieralo a skladovalo pri -70 °C až do použitia. Hladiny IL-1β, IL-6, TNF-αa PGE2 v sére sa merali pomocou súprav ELISA od R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) podľa pokynov výrobcu.

2.4.5. Kvantitatívna RT-PCR analýza v reálnom čase

Celková RNA bola extrahovaná z tkaniva kolenného kĺbu pomocou činidla TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), reverzne transkribovaná do cDNA a amplifikovaná pomocou PCR pomocou súpravy TM One Step RT PCR so zeleným SYBR (Applied Biosystems , Grand Island, NY, USA). Kvantitatívna PCR v reálnom čase sa uskutočnila pomocou systému Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Sekvencie primérov a sekvencia sondy sú uvedené v tabuľke1. Alikvóty vzorky cDNA a rovnaké množstvo GAPDH cDNA sa amplifikovali s TaqMan® Universal PCR master zmesou obsahujúcou DNA polymerázu podľa pokynov výrobcu (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Podmienky PCR boli 2 minúty pri 50 °C, 10 minút pri 94 °C, 15 s pri 95 °C a 1 minúta pri 60 °C počas 40 cyklov. Koncentrácia cieľového génu sa stanovila pomocou porovnávacej metódy Ct (prahové číslo cyklu v krížovom bode medzi grafom amplifikácie a prahom) podľa pokynov výrobcu.

Cena FOB:0,5 – 9 999 USD / kus

Minimálne množstvo objednávky:100 kusov/kusov

Schopnosť zásobovania:10 000 kusov/kusov za mesiac

Pošlite nám e-mail

Detail produktu

Štítky produktu

Osteoartritída (OA) je najčastejším ochorením pohybového aparátu a najčastejším degeneratívnym ochorením kĺbov u starších ľudí.1]. OA je stav spôsobený čiastočne zranením, stratou štruktúry a funkcie chrupavky a dysreguláciou prozápalových a protizápalových dráh [2,3]. Primárne postihuje kĺbovú chrupavku a subchondrálnu kosť synoviálnych kĺbov a vedie k zlyhaniu kĺbov, čo vedie k bolestiam pri prenášaní hmotnosti vrátane chôdze a státia [4].

Neexistuje žiadny liek na OA, pretože je veľmi ťažké obnoviť chrupavku, keď je zničená [5]. Cieľom liečby je zmierniť bolesť, zachovať alebo zlepšiť pohyblivosť kĺbov, zvýšiť pevnosť kĺbov a minimalizovať invalidizujúce účinky ochorenia. Farmakologická liečba OA je zameraná na zníženie bolesti s cieľom zvýšiť funkciu kĺbov a kvalitu života pacienta. Hoci deštrukcia chrupavky je hlavnou udalosťou pri OA, degradácia kolagénu je základnou udalosťou, ktorá určuje ireverzibilnú progresiu OA v spojení so zápalom.6,7]. Očakáva sa, že liečba s protizápalovou a chondroprotektívnou aktivitou zmierni bolesť a zachová integritu matrice u pacientov s OA.

Preto bude zníženie zápalu pravdepodobne prospešné pri liečbe OA. Nedávne štúdie naznačujú ochrannú úlohu rastlinných zdrojov pri progresii OA, pokiaľ ide o zmiernenie zápalu chondrocytov a ďalšiu deštrukciu chrupavky prostredníctvom ich schopnosti interagovať s tkanivami spojenými s kĺbmi, čo vedie k zmierneniu bolesti kĺbov [8].

Koreň zSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) bol široko používaný v tradičnej medicíne na liečbu bolesti hlavy, bolesti, zápalu a artritídy v Kórei a Číne [9,10]. Rozmanité farmakologické účinkySaposhnikovia divaricata(SD) tiež zahŕňajú protizápalové, analgetické, antipyretické a antiartritické vlastnosti [9,11]. Nedávna štúdia preukázala, že SD chromónový extrakt má potenciálne antireumatoidné účinky na artritídu u myší na modeli kolagénom indukovanej artritídy.10]; Uskutočnilo sa však málo štúdií na podporu protizápalovej a antiartritickej aktivitySaposhnikovia divaricataextrakt (SDE).

Preto táto štúdia skúmala protizápalové a antiosteoartritické aktivity 70% etanolového extraktu SD. Najprv sa hodnotil protizápalový účinok SDEin vitrov bunkách RAW 264.7 indukovaných LPS. Ďalej sa antiosteoartritický účinok SDE meral hodnotením distribúcie hmotnosti, degradácie kĺbovej chrupavky a zápalových reakcií na potkanom modeli OA indukovanej jodoacetátom sodným (MIA-).